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The expression in E. coli of synthetic repeating polymeric genes coding for poly(L-aspartyl-L-phenylalanine).

机译:编码聚(L-天冬氨酰-L-苯丙氨酸)的合成重复聚合基因在大肠杆菌中的表达。

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摘要

Two dodecadeoxynucleotides of defined sequence have been synthesised by phosphotriester methodology. They can be polymerised to give a double stranded DNA which codes, when read in the correct phase, for the repeating dipeptide poly(aspartyl-phenylalanine). This polymeric DNA has been cloned in E. coli K12 using as vector a plasmid having a controllable bacterial promoter upstream of the insertion site. Clones containing genes coding for up to 150 repeats of (aspartyl-phenylalanine) have been isolated and characterised. The polymeric inserts appear to be stable over many generations and are expressed in E. coli under the control of the bacterial promoter, to give a polymer of phenylalanine and aspartic acid which may be broken down enzymically to yield aspartyl-phenylalanine.
机译:已通过磷酸三酯方法合成了两个确定序列的十二烷氧基核苷酸。它们可以聚合得到双链DNA,当在正确的相中读取时,该DNA编码为重复的二肽聚(天冬氨酰-苯丙氨酸)。使用在插入位点上游具有可控细菌启动子的质粒作为载体,将该聚合DNA克隆到大肠杆菌K12中。已分离并鉴定了包含编码多达150个(天冬氨酰-苯丙氨酸)重复序列的基因的克隆。聚合物插入物似乎在许多代中都是稳定的,并且在细菌启动子的控制下在大肠杆菌中表达,得到苯丙氨酸和天冬氨酸的聚合物,其可以被酶分解以产生天冬氨酰-苯丙氨酸。

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